干粉培養(yǎng)基使用過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題

1、容器潔凈度的影響
*洗滌劑中含有表面活性劑，會(huì)影響微生物生長(zhǎng)。
*自來(lái)水中的某些離子成分可能會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)沉淀。
*其他影響：例如影響觀察熒光
2、配制培養(yǎng)基用水的要求
* 去離子水或蒸餾水
*pH值：5.5-7.5
*水質(zhì)不合格的影響
   ※異常沉淀：如EC肉湯（水質(zhì)偏酸會(huì)產(chǎn)生膽酸鹽沉淀）。
   ※ 顏色異常：如SS瓊脂、TCBS瓊脂。
   ※含瓊脂培養(yǎng)基凝膠強(qiáng)度下降。
N/T 0330-2010（ISO 7218）、SN/T 1538.1-2005 (ISO 11133-1)均不推薦使用“超凈機(jī)”制備的水，而是推薦“蒸餾水”，單蒸水即可.
3、常用加熱煮沸方式的比較
 *直接用電爐加熱：耗時(shí)且含瓊脂培養(yǎng)基容易燒糊
*隔水煮沸的弊端
※溫度不夠，達(dá)不到滅菌效果。
※經(jīng)隔水煮沸的含瓊脂培養(yǎng)基，在水浴的過(guò)程中易出現(xiàn)分層現(xiàn)象，這是由目前國(guó)產(chǎn)瓊脂的現(xiàn)狀所決定的。
 *為您提供一種快速便捷的方式
※ 第一步：采用微波爐適當(dāng)加熱
※ 第二步：在電爐上繼續(xù)加熱至沸騰
4、滅菌效果監(jiān)測(cè)的重要性和常用方法
*可能引發(fā)的問(wèn)題
※滅菌不徹底
※ 同一滅菌鍋內(nèi)不同位置滅菌條件不均，導(dǎo)致同一批高壓
的培養(yǎng)基顏色不一致，如BGLB、EE肉湯等
* 常用監(jiān)測(cè)方法
※ 化學(xué)指示卡：使用方便
高壓后可立即得知監(jiān)測(cè)結(jié)果
※ 生物指示劑：準(zhǔn)確性高
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5、含瓊脂培養(yǎng)基水浴及復(fù)溶的要求
* 建議水浴溫度在50℃左右，時(shí)間不宜超過(guò)4h。
*如果不能在4h內(nèi)及時(shí)使用，應(yīng)迅速冷卻，使其凝固，使用前再進(jìn)行復(fù)溶。
* 不可反復(fù)復(fù)溶，否則會(huì)影響培養(yǎng)基的pH值和凝膠強(qiáng)度。
6、導(dǎo)致顏色差異的原因
*干粉顏色差異
※由指示劑的批間差異造成的培養(yǎng)基干粉在允許范圍內(nèi)的顏色差異，以微生物質(zhì)控指標(biāo)為準(zhǔn)。
※產(chǎn)品變質(zhì)：如SC增菌液干粉變紅，說(shuō)明亞硒酸鹽已被氧化，不能使用，建議冷藏保存。
*溶液及平板顏色差異
※正常差異：指示劑的批間差異造成的
※某些含有酸堿指示劑的培養(yǎng)基，其pH值是一個(gè)范圍，在這個(gè)范圍內(nèi)，顏色略有差異也是正?，F(xiàn)象。
※非正常差異：pH值異常導(dǎo)致的，可能是培養(yǎng)基或配制用水的pH值異常。
7、導(dǎo)致不正常沉淀的原因
* 培養(yǎng)基變質(zhì)：過(guò)期失效、吸潮
* 容器不潔凈
* 配制用水的問(wèn)題（見(jiàn)常見(jiàn)問(wèn)題2）
* 沒(méi)有完全溶解
* 過(guò)度加熱
8、導(dǎo)致pH值異常的原因
* 培養(yǎng)基變質(zhì)：過(guò)期、吸潮
* 容器不潔凈
* 配制用水的問(wèn)題（見(jiàn)常見(jiàn)問(wèn)題2）
* 沒(méi)有完全溶解
* 過(guò)度加熱
* 反復(fù)復(fù)溶（見(jiàn)常見(jiàn)問(wèn)題5）
9、導(dǎo)致凝膠強(qiáng)度下降的原因
* 沒(méi)有充分混勻
* 過(guò)度加熱
* 反復(fù)復(fù)溶（見(jiàn)常見(jiàn)問(wèn)題5）
* pH值偏低
10、培養(yǎng)基保存的注意事項(xiàng)
*培養(yǎng)基的保存條件：避光保存于陰涼干燥處，使用后，擰緊瓶蓋，避免吸潮、氧化或污染。
* 保質(zhì)期：一般未開封的培養(yǎng)基可保質(zhì)３年，已開封的可保質(zhì)半年。開封后應(yīng)注明開封日期。