銅綠假單胞菌快速檢測(cè)儀器試劑

銅綠假單胞菌檢測(cè)傳統(tǒng)國(guó)標(biāo)方法：
         參 考 《飲 用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》GB/T8538-2008/54 銅綠假單胞菌-濾膜法進(jìn)行檢驗(yàn)。
具體步驟：將250 mL水樣用孔徑為0.45 μm的濾膜過濾，并將濾膜移至CN 瓊脂選擇性培養(yǎng)基上，36 ℃±1℃恒溫培養(yǎng)48 h。銅綠假單胞菌在CN瓊脂出現(xiàn)的菌落形態(tài)有3 種：有膿青素產(chǎn)生的藍(lán)/綠色、無熒光的菌落，直接判為檢出；產(chǎn)生有熒光素的黃色菌落，進(jìn)一步做產(chǎn)氨(乙酰胺肉湯)試驗(yàn)確認(rèn)，產(chǎn)氨試驗(yàn)陽性的判為檢出；產(chǎn)生紅膿素的紅褐色、無熒光的菌落，要繼續(xù)做氧化酶試驗(yàn)、產(chǎn)氨試驗(yàn)、熒光(金氏B 斜面)試驗(yàn)，若氧化酶陽性、產(chǎn)氨試驗(yàn)陽性結(jié)果判為銅綠假單胞菌檢出。
 
銅綠假單胞菌快速檢測(cè)試劑盒快速檢測(cè)法簡(jiǎn)介：
         本試劑盒采用環(huán)介導(dǎo)的恒溫?cái)U(kuò)增法技術(shù)，用于包裝飲用水等水體中銅綠假單胞菌的快速檢測(cè)，并借助顯色指示劑直接判斷結(jié)果。
 
銅綠假單胞菌快速檢測(cè)試劑盒原理：
       環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法( loop-mediated isothermal amplification , LAMP)是2000 年開發(fā)的一種新穎的恒溫核酸擴(kuò)增方法，其特點(diǎn)是針對(duì)靶基因的6 個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)4 種特異引物，利用一種鏈置換DNA 聚合酶在等溫條件(63 ℃左右) 保溫30－60分鐘，即可完成核酸擴(kuò)增反應(yīng)。與常規(guī)PCR相比，不需要模板的熱變性、溫度循環(huán)、電泳及紫外觀察等過程。LAMP 是一種全新的核酸擴(kuò)增方法，具有簡(jiǎn)單、快速、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。該技術(shù)在靈敏度、特異性和檢測(cè)范圍等指標(biāo)上能媲美甚至優(yōu)于PCR技術(shù)，不依賴任何專門的儀器設(shè)備實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)高通量快速檢測(cè)，檢測(cè)成本遠(yuǎn)低于熒光定量PCR。
銅綠假單胞菌快速檢測(cè)儀器不需要昂貴專業(yè)儀器，但需要以下必備儀器設(shè)備：
    本試劑盒需要能準(zhǔn)確提供60-65℃及99℃恒溫條件的任何通用設(shè)備，如恒溫水浴鍋，恒溫箱、恒溫金屬浴、PCR儀等。
前處理必備儀器：膜過濾系統(tǒng)——推薦3聯(lián)不銹鋼過濾系統(tǒng)
                離心機(jī)——具備12000RPM轉(zhuǎn)速，適用24*1.5ml離心管的離心機(jī)
                微量移液器——移取量分別為1000μl,30μl,70μl,2.5μl的移液器
 
銅綠假單胞菌快速檢測(cè)試劑盒組成：24測(cè)試/盒
  

	規(guī)  格
干粉試劑	1管
復(fù)溶液	1管
裂解液	1管
陽性對(duì)照	1管
陰性對(duì)照	1管
顯色指示液	1管

銅綠假單胞菌快速檢測(cè)試劑操作步驟：
1、抽濾，提DNA  
將 250 mL 水樣用孔徑為0.45 μm 的濾膜過濾，將濾膜轉(zhuǎn)移至100 mL TSB培養(yǎng)基（內(nèi)含溴化十六烷基三甲胺和萘啶酮酸），選擇增菌18 h 后，吸取1 mL 增菌液，煮沸法提取DNA。
2、擴(kuò)增反應(yīng)：
根據(jù)說明書進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，將所有待測(cè)樣品及陽性陽性對(duì)照反應(yīng)管放入恒溫儀器，64℃
恒溫反應(yīng)一小時(shí)。
3、結(jié)果判定：
反應(yīng)結(jié)束后，不開蓋觀察結(jié)果。結(jié)果觀察在白色背景下進(jìn)行，陰性對(duì)照管呈淡橙色，陽性對(duì)照反應(yīng)管呈熒光綠，待測(cè)樣本反應(yīng)管以此為對(duì)照進(jìn)行判讀。
銅綠假單胞菌快速檢測(cè)試劑注意事項(xiàng)：
本試劑盒基于核酸的分子檢測(cè)，因此并非只能檢出銅綠假單胞菌的活菌，判定結(jié)果有時(shí)與傳統(tǒng)培養(yǎng)法不同。使用顯色指示劑時(shí)，在檢測(cè)結(jié)束后請(qǐng)勿開蓋，以防氣溶膠污染。
更多介紹詳見銅綠假單胞菌快速檢測(cè)試劑說明書。
操作示意圖（試劑實(shí)際用量，反應(yīng)時(shí)間等請(qǐng)參照銅綠假單胞菌快速檢測(cè)試劑說明書，以下圖片僅供參考）

                                              （銅綠假單胞菌快速檢測(cè)試劑檢測(cè)示意圖）


銅綠假單胞菌快速檢測(cè)試劑必備儀器設(shè)備推薦型號(hào)：

名稱	型號(hào)	備注	目錄價(jià)	優(yōu)惠價(jià)
3聯(lián)不銹鋼過濾系統(tǒng)	MFS-3A-250-k	含真空泵，濾膜噴槍。	14500	來電咨詢
恒溫金屬浴	K30	配置A，D兩模塊	2900+500	來電咨詢
離心機(jī)	H1-16K	12000rpm,另外配置角轉(zhuǎn)子。	4300+2800	來電咨詢
微量移液器（進(jìn)口）	D-10	0.5-10μl  （含2.5μl）	2357	1450
微量移液器（進(jìn)口）	D-100	10-100μl  （含30,70μl）	2105	1350
微量移液器（進(jìn)口）	D-1000	100-1000μl	2105	1350

 實(shí)驗(yàn)室如已有以上類似配置的儀器則無需另外購(gòu)買。

另有銅綠假單胞菌恒溫?zé)晒饪焖贆z測(cè)系統(tǒng)等致病菌快速檢測(cè)系統(tǒng)及配套儀器試劑盒。

更多銅綠假單胞菌快速檢測(cè)儀器試劑產(chǎn)品信息、報(bào)價(jià)單及微生物配套產(chǎn)品請(qǐng)來電咨詢。