2010版中國(guó)藥典培訓(xùn)回答（第1部分：培養(yǎng)基配制）

廣東省藥檢所對(duì)《中國(guó)藥典》2010版微生物專題培訓(xùn)班的有關(guān)問(wèn)題解答答案。
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120415/3980531/
 
1.含瓊脂培養(yǎng)基冷卻至25℃后已凝固，如何測(cè)定其pH？
答：有專門的固體培養(yǎng)基pH計(jì)，如Radiometer A /S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者M(jìn)icroelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。".
廈門敏測(cè)實(shí)驗(yàn)器材公司提示：有專業(yè)的固體培養(yǎng)基PH計(jì)：
固體培養(yǎng)基PH計(jì)產(chǎn)品請(qǐng)來(lái)電咨詢。
 
2..PH計(jì)測(cè)培養(yǎng)基的PH好像有比較大的差別，應(yīng)如何選擇PH計(jì)？（效價(jià)7.8的培養(yǎng)基我用普通理化室的PH計(jì)測(cè)定只有7.0左右，不知道是否因?yàn)樵诟邷叵聹y(cè)定（含瓊脂）
答：培養(yǎng)基應(yīng)冷卻到20℃～25℃才可測(cè)量，另外PH計(jì)應(yīng)按時(shí)校準(zhǔn)。
 
3.生物指示劑對(duì)滅菌設(shè)備的性能，滅菌程序的驗(yàn)證是只驗(yàn)證一次呢，而后進(jìn)行定期驗(yàn)證，如果生物指示劑換批號(hào)，是否要重新驗(yàn)證？
答：應(yīng)定期或不定期驗(yàn)證一次，確保滅菌設(shè)備正常。生物指示劑更換批號(hào)，不需重新驗(yàn)證。
 
4..紫外線滅菌后，需要多久進(jìn)去操作？
答：打開通風(fēng)凈化設(shè)備，半小時(shí)后可入內(nèi)操作。
 
5.孟加拉培養(yǎng)基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進(jìn)行培養(yǎng)霉菌和酵母菌？
答：根據(jù)中國(guó)藥典，采用玫瑰紅鈉瓊脂。
 
6.配制PH值7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液時(shí)有時(shí)因?yàn)楦邏簻缇鳒缇^(guò)程溫度過(guò)高而導(dǎo)致培養(yǎng)基混濁了，這種情況緩沖液還能用嗎？
答：建議按正常溫度滅菌，混濁培養(yǎng)基建議不要使用。
 
7.培養(yǎng)基在冷藏中形成結(jié)晶怎么處理？①銷毀 ②加熱再用 ③待冷卻完用。
答：建議不要使用
 
8.融化的培養(yǎng)基為什么不能再冷水中冷卻？
答：防止受熱不均引起結(jié)塊
 
9.取菌后測(cè)PH：（25℃）培養(yǎng)基配制好測(cè)PH，取其中一瓶測(cè)PH，那這一瓶測(cè)完就不能用了，污染了。
答：也可在無(wú)菌條件下取出適量測(cè)pH.
 
10.配制分裝過(guò)程中能否使用不銹鋼鍋？
答：我實(shí)驗(yàn)室使用不銹鋼鍋，目前未發(fā)現(xiàn)異常。
 
11. 對(duì)新購(gòu)進(jìn)無(wú)菌0.9%氯化鈉（500ml）能否再次滅菌？
答：能。但包裝完好，購(gòu)入時(shí)間較短的無(wú)需滅菌。
 
12.“要定期對(duì)壓力表進(jìn)行檢定（消毒鍋），檢定周期一般為半年”，這句話怎樣理解，是廠家應(yīng)半年自己檢一次，還是有計(jì)量部門執(zhí)行？
答：由計(jì)量部門計(jì)量，計(jì)量后應(yīng)發(fā)有檢定證書。
 
13. 滅菌后，滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開，這段時(shí)間是否會(huì)造成過(guò)度滅菌。
答：自然冷卻過(guò)程已經(jīng)計(jì)算在正常滅菌時(shí)間內(nèi)了，不會(huì)造成過(guò)度滅菌。
 
14. 培養(yǎng)基常規(guī)質(zhì)控有無(wú)強(qiáng)制檢定項(xiàng)目？目前我們所做項(xiàng)目有：ph、無(wú)菌檢查、生長(zhǎng)檢查、是否符合藥典規(guī)定？
答：培養(yǎng)基應(yīng)按2010版藥典檢查。
 
15. 培養(yǎng)基所用器具若使用濕熱滅菌，是否必須待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中間過(guò)程怎樣防止微生物污染？
答：如果是馬上使用且不是用于非水溶性供試液的制備及實(shí)驗(yàn)，不一定要烘干；否則，應(yīng)干燥后使用，滅菌及干燥盡量在同一鍋里進(jìn)行，或用紗布和牛皮紙包扎緊密。
 
16. 培養(yǎng)基的避光儲(chǔ)存，是否配置好的培養(yǎng)基其全部放避光儲(chǔ)存？
答：最好都避光保存。無(wú)條件時(shí)，光敏感的培養(yǎng)基一定要。
 
17. 商品培養(yǎng)基干粉說(shuō)是加蒸餾水溶解，實(shí)際操作是否可以用純化水或注射用水？
答：只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長(zhǎng)的物質(zhì)的水均可。
 
18. 滅菌后的培養(yǎng)基是否都要測(cè)ph值？如何測(cè)定ph值？
答：每個(gè)制備批次的培養(yǎng)基都應(yīng)測(cè)定ph，可采用ph試紙或ph計(jì)測(cè)量。
廈門敏測(cè)實(shí)驗(yàn)器材公司提示： 有專業(yè)的固體培養(yǎng)基專業(yè)PH計(jì) 
固體培養(yǎng)基PH計(jì)產(chǎn)品 
 
19. 培養(yǎng)基及器具滅菌可否同一設(shè)備同滅菌時(shí)間進(jìn)行滅菌？
答：最好分開滅菌，條件不允許時(shí)可同爐滅菌，前提是都是潔凈無(wú)污染的。
 
20. 培養(yǎng)基的保溫能否用60℃的培養(yǎng)箱，它與45℃—55℃水浴鍋保溫方法有何不同？
答：不建議，因?yàn)闇囟炔煌?，長(zhǎng)時(shí)間高溫影響培養(yǎng)基質(zhì)量。
 
21. 培養(yǎng)基的貯存是否需要放置于2—10℃冰箱內(nèi)？
答：需冷藏保存的培養(yǎng)基外包裝上會(huì)寫明。
 
22. 培養(yǎng)基滅菌后成份會(huì)有所蒸發(fā)減少，如何處理這個(gè)問(wèn)題？
答：正常情況下蒸發(fā)量較少，可忽略不計(jì)。
 
23. 培養(yǎng)基融化后出現(xiàn)渾濁是有哪些方面的原因引起的？應(yīng)如何避免？
答：可能的情況有1培養(yǎng)基配置用水不符合規(guī)定；2滅菌過(guò)程溫度升溫慢或降溫慢；3培養(yǎng)基儲(chǔ)存不當(dāng)；4融化時(shí)沸騰時(shí)間較長(zhǎng)等。
 
24. 準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基有效期如何驗(yàn)證？
答：定期取出培養(yǎng)基驗(yàn)證其無(wú)菌性，促生長(zhǎng)能力等方面。
 
25. 某些培養(yǎng)基無(wú)pH變化范圍，應(yīng)該怎么確定該培養(yǎng)基的pH范圍呢？
答：向培養(yǎng)基供應(yīng)商索取。
 
26. 用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基預(yù)培養(yǎng)時(shí)間如何確定？
答：與正常實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)一樣。
 
27. 培養(yǎng)基加熱的溫度一般超過(guò)100℃，是否符合要求？有無(wú)時(shí)間限制？
答：是指哪個(gè)環(huán)節(jié)？培養(yǎng)基滅菌溫度規(guī)定是超過(guò)100℃，有具體的時(shí)間要求，如果是指固體培養(yǎng)基使用前的加熱熔化，則完全融化即可，避免長(zhǎng)時(shí)間高溫加熱。
 
28. "培養(yǎng)基瓶的裝量,例：瓶裝量是500ml/瓶，裝量超過(guò)500ml/每瓶是否可行？
答：培養(yǎng)基的分裝量不得超過(guò)容器的2/3。"
 
29. 同一批培養(yǎng)基代表同一批號(hào)生產(chǎn)的培養(yǎng)基嗎？
答：是。
 
30. 培養(yǎng)基配制好滅菌后，在高壓容器中保溫降至50℃左右，可不可行？
答：建議最好不要，避免過(guò)度受熱。
 
31. 脫水培養(yǎng)基對(duì)濕度是否有要求？多少適宜？
答：按要求陰涼干燥環(huán)境儲(chǔ)存即可。
 
32. 對(duì)照培養(yǎng)基何時(shí)能購(gòu)買？
答：已經(jīng)陸續(xù)開始銷售。
 
33. 培養(yǎng)基pH值測(cè)定溫度在25℃，這個(gè)溫度應(yīng)怎么控制？比如固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基使用過(guò)程中還能調(diào)節(jié)pH值嗎？
答：可水浴控制培養(yǎng)基溫度。
 
34. 配制培養(yǎng)基過(guò)程中，按說(shuō)明書稱定量，加規(guī)定的純化水，煮沸溶解，為了避免煮沸過(guò)程總減少水分，是否要在配制過(guò)程適當(dāng)增加水?比如配硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基.
答：可適量增加，自己掌握。
 
35. 商品培養(yǎng)基可否按照使用者驗(yàn)證的參數(shù)滅菌？
答：理論上可以，請(qǐng)自行掌握。
 
36. 商品培養(yǎng)基一定要當(dāng)天配當(dāng)天用嗎？可否在一周內(nèi)用完？
答：不是即配即用的培養(yǎng)基的話，儲(chǔ)存得當(dāng)，可以使用。
 
37. 稱量培養(yǎng)基時(shí)，注意不要吸入粉末，這粉末是指何物？
答：就是你所稱量的干粉培養(yǎng)基
廈門敏測(cè)實(shí)驗(yàn)器材有限公司提醒：部分培養(yǎng)基成分含有毒性，稱量干粉培養(yǎng)基請(qǐng)佩戴防塵口罩，或購(gòu)買顆粒劑培養(yǎng)基，減少吸入粉末。
 
38. 從中檢所購(gòu)買的培養(yǎng)基還需要做適用性檢查嗎？
答：因?yàn)橐彩谴笈可a(chǎn)的商業(yè)化培養(yǎng)基，應(yīng)該做適用性檢查。
 
39. 若商品化的脫水培養(yǎng)基說(shuō)明書上的處方與藥典上的標(biāo)示的處方不符的，不能用嗎？
答：不能。
 
10. 用于調(diào)pH值用的酸、堿溶液經(jīng)滅菌后會(huì)對(duì)Hcl溶液，NaOH溶液發(fā)生物理、化學(xué)變化嗎？如果有變化影響，會(huì)影響到所調(diào)培養(yǎng)基的質(zhì)量嗎？
答：理論上會(huì)，但未經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)。
 
41. 如果購(gòu)買的預(yù)灌裝培養(yǎng)基，是否需要做培養(yǎng)基靈敏度？答：需要。
 
42. 購(gòu)買回來(lái)的培養(yǎng)基有幾個(gè)批號(hào)，那么適用性檢查是只需做一次？還是每個(gè)批號(hào)都需做?
答：每批都需做
 
43. 如果不同次買回來(lái)的培養(yǎng)基是同一批號(hào)，是否后面買回來(lái)的培養(yǎng)基不需要做適用性檢查?
答：最好做
 
44. 如果配制和滅菌過(guò)程沒(méi)有驗(yàn)證，是否每一次配制培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行適用性檢查？
答：是。
 
45. 生物指示劑菌片濃度液如何進(jìn)行復(fù)核？才可確認(rèn)所購(gòu)買生物指示劑菌片濃度符合要求.
答：我所未使用該產(chǎn)品，無(wú)此方面經(jīng)驗(yàn)。
 
46. 紫外燈的使用期限，怎么規(guī)定，通常多長(zhǎng)時(shí)間更換紫外燈？
答：每種型號(hào)的使用壽命不相同，有1000小時(shí)、1500小時(shí)、2000小時(shí)等，買來(lái)時(shí)應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書。
廈門敏測(cè)實(shí)驗(yàn)器材有限公司提醒：有殺菌燈紫外照度計(jì)儀可以檢測(cè)殺菌紫外燈的紫外強(qiáng)度。
紫外強(qiáng)度計(jì)儀器請(qǐng)來(lái)電咨詢
 
47. 培養(yǎng)基滅菌，若規(guī)定為121℃15分鐘，實(shí)際操作為（121 2）℃，（15 3）分鐘，這樣可取嗎？是否只能按照培養(yǎng)基配制121℃15分鐘說(shuō)明來(lái)配制？
答：建議按照規(guī)定時(shí)間進(jìn)行滅菌。
 
48. 培養(yǎng)基的滅菌程序如何驗(yàn)證？
答：可采用生物指示劑進(jìn)行驗(yàn)證。
廈門敏測(cè)實(shí)驗(yàn)器材有限公司提示：3M蒸汽滅菌生物指示劑產(chǎn)品貨號(hào)3M1262
 
49. 煮培養(yǎng)基，用不銹鋼鍋在電磁爐上煮可行？硫乙醇培養(yǎng)基是否要煮沸？如何煮沸？用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸可行嗎？可不可以水浴煮沸呢？
答：硫乙醇應(yīng)煮沸，量大時(shí)，我實(shí)驗(yàn)室用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸。
 
50. 從中檢所購(gòu)買的培養(yǎng)基還需要做適用性檢查嗎？
答：因?yàn)橐彩谴笈可a(chǎn)的商業(yè)化培養(yǎng)基，必須做。
 
51. 在滅菌條的效力驗(yàn)證時(shí)選取微生物指示劑，由于我公司產(chǎn)品品種多，同一種微生物指示劑又存在著在不同介質(zhì)中耐熱性（D值）不同，那應(yīng)如何測(cè)定某微生物指示劑在某一介質(zhì)耐熱性（D值）呢？應(yīng)如何選取最適宜的微生物指示劑呢？
答：選擇生物指示劑，應(yīng)以所選用的滅菌方法向?qū)?yīng)。
 
58. 各種成品培養(yǎng)基要求的滅菌溫度與時(shí)間不一樣，做滅菌鍋的驗(yàn)證應(yīng)該如何確定溫度和時(shí)間？
答：我們未遇此種情況，但認(rèn)為應(yīng)按照最低溫度和最短時(shí)間進(jìn)行驗(yàn)證。
 
52. 瓊脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用，但現(xiàn)有規(guī)定要求培養(yǎng)基需要經(jīng)適用性檢查后才可使用，時(shí)間上的沖突如何解決？
答：一個(gè)批次的培養(yǎng)基做一次適用性檢查即可，以后再使用時(shí)可現(xiàn)配現(xiàn)用。
 
53. 培養(yǎng)基（微生物限度用）是否需作無(wú)菌性檢查？若培養(yǎng)基還需作陽(yáng)性生長(zhǎng)試驗(yàn)，那么無(wú)菌檢查與陽(yáng)性檢查是否應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行？
答：按藥典規(guī)定進(jìn)行驗(yàn)證。陽(yáng)性應(yīng)在專門區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。
 
54. 是不是有一種1ml的沙土培養(yǎng)管（用來(lái)傳代接種），在哪里可以買到？
答：我們未用過(guò)，不清楚如何購(gòu)買。
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55. 固體培養(yǎng)基能存多久？（已滅菌的）融化的培養(yǎng)基在水浴中不超8小時(shí)，而它呢？
答：視培養(yǎng)基種類而定，不可一概而論。
 
56. 可否使用紫外線強(qiáng)度指示卡來(lái)檢測(cè)紫外燈是否需要更換？
答：我們未用過(guò)紫外線強(qiáng)度指示卡，我們了解有一種紫外線強(qiáng)度檢測(cè)儀大概可以滿足你們的要求。
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57. 如培養(yǎng)基在高壓滅菌器中溫度需自然下降20度才開蓋嗎？
答：高溫滅菌器有安全閥，溫度下降到安全閥可打開時(shí)將培養(yǎng)基取出室溫冷卻，各型號(hào)滅菌器安全開蓋溫度不盡相同。
 
58. 稀釋液滅菌后ph值是否有變化？有何影響？（如ph7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液，ph6.8無(wú)菌磷酸鹽緩沖液）
答：一般pH有下降現(xiàn)象，約0.2左右，不同培養(yǎng)基pH變化可能不同。
 
59. 省所能否幫企業(yè)代購(gòu)“對(duì)照培養(yǎng)基”？如能，如何聯(lián)系？
 
60. 對(duì)照培養(yǎng)基在省所可以買到嗎？
答：中檢所已經(jīng)陸續(xù)開售，請(qǐng)與我所業(yè)務(wù)科直接聯(lián)系（020-81854392）。
 
61. 按要求每批培養(yǎng)基要做系統(tǒng)適用性驗(yàn)證，下面分所或廠家如直接從省所購(gòu)買，省所買回來(lái)的時(shí)候肯定每批已已驗(yàn)證了，那下面分所還要做驗(yàn)證的話，那不就大大的浪費(fèi)人力、財(cái)力、物力?？煞袷∷?gòu)進(jìn)的不驗(yàn)證或提供驗(yàn)證報(bào)告？
答：各實(shí)驗(yàn)室配制培養(yǎng)基的程序不同，必須自己做驗(yàn)證。
 
62. 有些培養(yǎng)基要用到梭菌等，下面所可能一兩年也沒(méi)檢測(cè)陰道內(nèi)用藥，也很少用到這個(gè)菌，按驗(yàn)證要求，就得把各種菌買回去，還得花很多時(shí)間去維護(hù)、保管、傳代等，下面有些藥廠這方面的人才就更加稀缺，這就逼得很多廠家為了應(yīng)付檢查做更多的假記錄或買N支菌回來(lái)這只是為了應(yīng)付檢查。答：這種情況我們能理解，但是還請(qǐng)按照藥典規(guī)定處理吧。
 
63. 配好的MUG有沒(méi)有要求多長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)要使用完？可以一次過(guò)配很多，用上幾個(gè)星期？
答：請(qǐng)按藥典中對(duì)培養(yǎng)基的一般要求操作。
 
64. 配好的靛基質(zhì)有沒(méi)有要求多長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)要使用完？可以一次過(guò)配很多，用上幾個(gè)星期？
答：請(qǐng)放冰箱保存，我們的經(jīng)驗(yàn)可使用一到兩個(gè)月。
 
65. 對(duì)照培養(yǎng)基中檢所還是沒(méi)有賣，在10月1日未買到對(duì)照培養(yǎng)基之前，可否沿用05版藥典來(lái)確認(rèn)培養(yǎng)基適用性？
答：在未買到之前，請(qǐng)盡量購(gòu)買有資質(zhì)的品牌培養(yǎng)基。盡快按10版執(zhí)行。
 
66. 大腸埃希菌檢查時(shí)，MUG培養(yǎng)基必須在5小時(shí)和24小時(shí)，兩個(gè)時(shí)間段做觀察？還是選其中一個(gè)適應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)作觀察好？
答：如5小時(shí)可以明顯觀察到結(jié)果，就可做進(jìn)一步檢查。
 
67. 我公司是生產(chǎn)大容量注射液的，由于國(guó)家對(duì)滅菌效力F0值的要求不斷提高，結(jié)合我公司現(xiàn)行滅菌條件所達(dá)到的F0值不高，故必須進(jìn)行滅菌工藝變更，在滅菌工藝變更中，需做滅菌效力驗(yàn)證，需選取適宜的微生物指示劑。但由于我公司品種較多，同一微生物指示劑在不同品種藥液中會(huì)有不同的耐熱性（D值），這影響到我公司對(duì)微生物指示劑的選取，請(qǐng)問(wèn)國(guó)內(nèi)對(duì)耐熱性較高的微生物指示劑的耐熱性測(cè)定是怎樣的辦法？
 
答：我們未做過(guò)此類研究，請(qǐng)咨詢相關(guān)產(chǎn)品公司。
 
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